平板计数琼脂(PCA)
原 理:
胰蛋白胨提供碳源和氮源;酵母膏粉提供B族维生素;葡萄糖提供能源;琼脂是培养基的凝固剂。
配方(每升):
胰蛋白胨 | 5.0g |
酵母膏粉 | 2.5g |
葡萄糖 | 1.0g |
琼脂 | 15.0g |
终pH 7.0±0.2
使用方法:
1、称取本品23.5g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至*溶解,分装三角瓶,121℃高压灭菌15min,备用。
2、样品的稀释及处理,略。
3、根据商检的标准要求或对标本污染情况的估计,选择2—3个稀释度,分别在10倍递增稀释的同时,即以吸取该稀释度的吸管移1mL稀释液于灭菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。
4、稀释液移入平皿后,应及时将凉至45℃的琼脂培养基(可放置于45℃水浴箱保温)注入平皿约15mL,并转动平皿使混合均匀。同时将琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。
5、待琼脂凝固后,翻转平板,置36±1℃温箱内培养48±2h。
6、观察结果并进行计数。25-250个菌落为合适范围。
质量控制:
下列菌株在本培养基平板上,36±1℃培养48±2h后 ,结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 菌落 |
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 白色—灰白色
金黄色葡萄球菌 ATCC6538 良好 黄色 |
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期三年。